高压蒸汽灭菌锅注意事项有以下几点，第一，每次使用前必须向锅内加水，且达到水位标记处，第二，排蒸汽时需留有缝隙，使蒸汽畅通，第三，加热时，先打开排气阀，使锅内冷空气排出，排尽后便关闭排气阀。
通常灭菌完成后，等待锅中自然降压，如果排气太快锅内产生负压，那么瓶、袋内压力大于锅内压力，可能会导致料袋膨胀从而拉薄胀破，或液体外溢等状况。
高压蒸汽灭菌锅的压力表应定期检查，保证可以安全使用，若压力表指示不稳，或是无法恢复到0时，需要立即检修或更换。
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